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CAT酶活性测定

时间: 2025-03-02 22:38:53 作者: ng体育app官网入口

CAT酶活性测定

以1min内A240下降（三支测定管的平均值）的酶量为1个酶活单位（u），先求出3支测定管各自1min内A240下降值，按下式核算CAT活性。

（1）取10ml具塞试管，加2ml酶提取液于沸水浴中加热煮死，冷却备用。

（2）取10ml具塞试管，3支为测定管（3个重复），1支为对照，按下表参加试剂：

1.酶液提取：称取剪碎混匀的植物样品（如叶片等）1.00g置与预冷的研钵中，参加适量预冷的磷酸缓冲液和少数石英砂冰浴研磨成匀浆后，转入10ml容量瓶中，并用缓冲液冲刷研钵数次，兼并冲刷液，并定容到10ml。取提取液5ml于离心管中，在4℃、15000g下离心15min，上清液即为过氧化氢酶粗提液。4℃下保存备用。

H2O2在240nm波长下有激烈吸收，过氧化氢酶能分化过氧化氢，使反响溶液吸光度(A240)随反响时间而下降。依据丈量吸光率的改变速度即可测出过氧化氢酶的活性。